Efect of Vitreoscilla hemoglobin on recombinant protein expression and energy and redox state of CHO cells

Abstract

La expresión de la hemoglobina de Vitreoscilla(VHb) confiere mejoras considerables a las fábricas celulares microbianas. Sin embargo, el efecto de VHb en células animales se ha estudiado muy poco. Para entender mejor el impacto de VHb en el metabolismo energético aerobio y la expresión de proteína recombinante, se obtuvieron células CHO-K1 que expresan de manera estable la proteína verde fluorescente (GFP, por sus siglas en inglés :green fluorescent protein) y se transfectaron para expresar VHb. La expresión de GFP se incrementó ligeramente, mientras que la viabilidad celular y el potencial de membrana mitocondrial no fueron afectados por la expresión de VHb. A diferencia de la disminución en la relación NAD+/NADH y el contenido de ATPen las células, la proporción de NADP+/NADPH se incrementó como consecuencia de la presencia de VHb. Estos resultados sugieren que VHb puede mejorar la expresión de proteína recombinante en las células CHO alterando el metabolismo energético. Esto puede ser útil para el diseño de fábricas celulares robustas para aplicaciones industriales.